혈액은 사용 전
작성자 천재 작성일 2026-05-18 조회수 8

혈액은 사용 전까지 37°C에서 저속으로 지속적으로 회전시키면서 보관했습니다. 혈소판 풍부 혈장(PRP)은 200 × g 에서 20분간 원심분리하여 얻었습니다. 세척된 혈소판을 얻기 위해, 1.5 mL의 PRP를 4.5 mL의 Tyrode 완충액(137 mM NaCl, 3 mM KCl, 1 mM MgCl₂ , 0.4 mM NaH₂PO₄ , 12 mM NaHCO₃ , 5.5 mM D-포도당, 4 mM HEPES, 1 g/L 소 혈청 알부민) (pH 6.5)에 첨가한 후, 880 × g 에서 10분간 두 번째 원심분리를 수행하였다. 이렇게 얻은 혈소판 침전물을 Tyrode 완충액(pH 7.4)에 재현탁시켰다. 이렇게 얻은 혈소판 현탁액을 실험에 즉시 사용하였다.

약물 치료

모든 실험에서 혈소판은 접종 전에 트롬빈이 첨가된 Tyrode 용액(pH 7.4) (Tyrode 용액 1mL당 트롬빈 0.13U [#T6884; Sigma-Aldrich])에서 1분간 배양하여 활성화시켰습니다. 미세 패턴이 새겨진 유리 바닥 접시에 혈소판 현탁액 10μL를 넣고 37°C에서 10분간 배양한 후, 부착되지 않은 혈소판을 제거하기 위해 트롬빈이 첨가된 Tyrode 용액(pH 7.4)으로 한 번 세척했습니다. 혈소판이 37°C에서 10분 더 퍼지도록 한 후, 트롬빈이 첨가된 Tyrode 용액(pH 7.4)으로 세 번 세척했습니다.

 

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